एलिसा परीक्षण कई बीमारियों का पता लगाता है, यही वजह है कि यह दवा और अधिक में व्यापक आवेदन मिला है। हालांकि, एलिसा परीक्षण को लाइम रोग के निदान के लिए जाना जाता है। एलिसा परीक्षण क्या है? परिणामों की व्याख्या कैसे करें? परीक्षण की कीमत क्या है?
विषय - सूची:
- एलिसा परीक्षण - इसका क्या पता चलता है? एलिसा परीक्षण के आवेदन
- एलिसा परीक्षण - परीक्षण क्या है?
- एलिसा परीक्षण और लाइम रोग - कब प्रदर्शन करना है?
- एलिसा परीक्षण - मूल्य। एलिसा परीक्षण की लागत कितनी है?
- एलिसा परीक्षण - परिणाम। क्या वे झूठे सकारात्मक हो सकते हैं?
- एलिसा परीक्षण - परिणाम। क्या वे झूठे नकारात्मक हो सकते हैं?
एलिसा परीक्षण, यानी एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट परख, आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली प्रयोगशाला विधि है, जो दूसरों के बीच में काम करती है, रक्त में एंटीबॉडी की मात्रात्मक पहचान के लिए।
इस कारण से, एलिसा परीक्षण में जीवाणु रोगों के निदान में आवेदन पाया गया है, जैसे लाइम बोरेलिओसिस।
एलिसा पद्धति का लाभ इसकी सादगी और त्वरित कार्यान्वयन के साथ-साथ उच्च संवेदनशीलता की संभावना है। एलिसा विधि का उपयोग विशेष प्लास्टिक प्लेटों के साथ किया जाता है, जैसे कि बोरेलिया प्रोटीन (एंटीजन) और विशिष्ट मोनोक्लोनल एंटीबॉडी, जो रोगी के नमूने में एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए डिज़ाइन किए गए हैं।
एलिसा परीक्षण - इसका क्या पता चलता है? एलिसा परीक्षण के आवेदन
एलिसा विधि की उच्च संवेदनशीलता और सादगी ने इसे कई बीमारियों के निदान में लागू किया, लेकिन यह सबसे अच्छा लाइम रोग के निदान पद्धति के रूप में जाना जाता है।
लिम बोरेलीओसिस के निदान के मामले में, तथाकथित अप्रत्यक्ष एलिसा, जो परीक्षण सामग्री में विशिष्ट आईजीएम या आईजीजी का पता लगाने की अनुमति देता है। उसी तरह, निदान के लिए एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है:
- वायरल संक्रमण: हर्पीसविरस (दाद, दाद दाद, एपस्टीन-बार, साइटोमेगालोवायरस), एचआईवी, हेपेटाइटिस वायरस (एचबीवी और एचसीवी)
- प्रोटोजोआ संक्रमण: टोक्सोप्लाज़मोसिज़, जियार्डियासिस
- ऑटोइम्यून रोग: सीलिएक रोग (एंटी-टीटीजी या एंटी-डीपीजी एंटीबॉडीज), हाशिमोटो रोग (एंटी-टीजी और एंटी-टीपीओ एंटीबॉडी), सूजन आंत्र रोग (एंटी-एएससीए और एंटी-एएनसीए एंटीबॉडी)
- परजीवी रोगों और एलर्जी जिसमें विशिष्ट IgE एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है। उनका बढ़ा हुआ स्तर एलर्जी की उपस्थिति का संकेत दे सकता है, जैसे पराग और भोजन, या परजीवी आक्रमण (सशस्त्र टैपवार्म, मानव राउंडवॉर्म)
एलिसा विधि (तथाकथित सैंडविच एलिसा) में संशोधन भी हैं, जो एंटीबॉडी के अलावा प्रोटीन के नमूने का पता लगाने की अनुमति देते हैं। फिर परीक्षण का उद्देश्य जैविक सामग्री में पता लगाना है:
- वायरस या बैक्टीरिया के टुकड़े, सबसे अधिक बार वे किसी दिए गए रोगज़नक़ की विशेषता एंटीजन होते हैं
- सीरम हार्मोन, जैसे एस्ट्रोजन, प्रोलैक्टिन, टीएसएच, एफटी 4, कोर्टिसोल
- एंजाइम, जैसे कैलप्रोटेक्टिन, अग्नाशयी इलास्टेज, क्षारीय फॉस्फेट
- ट्यूमर मार्कर, उदा। CA-125
- सीरम में दवाओं की उपस्थिति
यह विधि खाद्य उद्योग में भी लागू होती है, जहां यह भोजन में एलर्जी (जैसे दूध, मूंगफली), जीएमओ या विषाक्त पदार्थों के निशान का पता लगा सकती है।
एलिसा परीक्षण - इसके बारे में क्या है?
उदाहरण के लिए, एलिसा विधि का उपयोग कर लाइम बोरेलिओसिस जैविक सामग्री में प्रतिरक्षा प्रोटीन का पता लगाने में शामिल है - एंटीबॉडी जो बोरेलिया एंटीजन के खिलाफ प्रतिक्रिया के दौरान उत्पन्न होती हैं।
एंटीबॉडी का परीक्षण दो वर्गों, आईजीएम और आईजीजी में किया जाता है। जब वे बैक्टीरिया के संपर्क में आते हैं, तब IgM शरीर में दिखाई देने वाले पहले एंटीबॉडी होते हैं, और वे समय के साथ कम हो जाते हैं।
उनका स्थान अधिक लगातार आईजीजी एंटीबॉडी द्वारा लिया जाता है जो कई दर्जन वर्षों तक शरीर में रह सकते हैं।
इस तरह, शरीर में जीवाणुओं की उपस्थिति का अप्रत्यक्ष रूप से परीक्षण किया जाता है, जो विशेष रूप से बोरेलिया स्पाइरोकेट्स के खिलाफ निर्देशित एंटीबॉडी का पता लगाते हैं।
संक्रमण के विभिन्न चरणों में एंटीबॉडी को विभिन्न प्रकार के बोरेलिया प्रोटीन के खिलाफ निर्देशित किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, एक प्रारंभिक चरण में यह p41 प्रोटीन है।
बाद के चरणों में, अधिक से अधिक प्रोटीन दिखाई देने लगते हैं, जैसे कि पी 21, पी 30, पी 39, पी 43। यही कारण है कि लाइम रोग का निदान बेहद मुश्किल है।
एक उच्च नैदानिक मूल्य के परीक्षण के लिए बैक्टीरिया प्रोटीन का चयन बेहद महत्वपूर्ण है। इसलिए, लाइम रोग के निदान में नियमित रूप से, द्वितीय-पीढ़ी या तृतीय-पीढ़ी एलिसा परीक्षणों का उपयोग किया जाना चाहिए जिसमें सबसे विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए प्रोटीन के सेट का चयन किया जाता है।
एलिसा परीक्षण और लाइम रोग। कब करना है?
Lyme borreliosis एक बैक्टीरिया से होने वाली बीमारी है, जो Borrelia burgdorferi और इसकी कई किस्मों के बैक्टीरिया के कारण होती है।
बोरेलिया के खिलाफ प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की जटिलता और प्रयोगशाला विधियों की खामियों के कारण बीमारी का निदान आसान नहीं है।
सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली प्रयोगशाला विधि उच्च संवेदनशील एलिसा विधि है, जो बैक्टीरिया प्रोटीन के खिलाफ उठाए गए विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाती है।
Lyme borreliosis के निदान में, एक अप्रत्यक्ष एलिसा पद्धति का उपयोग किया जाता है जिसमें निम्नलिखित चरण प्रतिष्ठित होते हैं:
- रोगी से एकत्र सामग्री के साथ प्लेट पर कुओं का ऊष्मायन, जैसे सीरम। यदि परीक्षण सामग्री में बोरेलिया के खिलाफ एंटीबॉडी हैं, तो वे अच्छी तरह से प्रतिक्रिया के तल पर प्रोटीन से बांधते हैं
- फिर अतिरिक्त सीरम को एक विशेष वाशिंग द्रव (बफर) और तथाकथित के साथ बाहर निकाल दिया जाता है संयुग्म, जो एक एंजाइम से जुड़ा हुआ एंटीबॉडी है जो प्रतिक्रिया कुओं में पहले से जुड़े एंटीबॉडी से बांधता है
- फिर संयुग्म के लिए सब्सट्रेट जोड़ा जाता है और एक रंग प्रतिक्रिया होती है (सकारात्मक परिणाम) या कोई रंग प्रतिक्रिया नहीं होती है (नकारात्मक परिणाम)
- अंतिम चरण रोगी के सीरम में बोरेलिया के खिलाफ एंटीबॉडी की एकाग्रता के रीडर (स्पेक्ट्रोफोटोमीटर) द्वारा पढ़ना है
लाइम रोग के लिए एलिसा विधि रक्त से किया जाता है, और मस्तिष्क संबंधी तरल पदार्थ से भी न्यूरोलॉजिकल लक्षणों (न्यूरोब्रेलेरोसिस) के मामले में।
श्लेष द्रव का परीक्षण नहीं किया जाना चाहिए क्योंकि झूठे-सकारात्मक परिणामों की एक उच्च संभावना है।
रोग के निदान के लिए आधार नैदानिक लक्षण हैं जो इसे इंगित करते हैं, प्रयोगशाला परीक्षणों के परिणामों से इसकी पुष्टि की जाती है।
लक्षणों के बिना एक प्रयोगशाला परीक्षण के परिणाम के अलावा लाइम रोग के निदान को अधिकृत नहीं करता है, क्योंकि यह दिखाया गया है कि बोरेलिया के खिलाफ एंटीबॉडी स्वस्थ लोगों में भी पाए जाते हैं।
Lyme borreliosis का सीरोलॉजिकल डायग्नोसिस एक सेमी-क्वांटिटेटिव स्क्रीनिंग ELISA टेस्ट से शुरू होता है। यदि परिणाम नकारात्मक है, तो इसका मतलब है कि कोई बोरेलिया स्पाइरोकेट्स का पता नहीं चला है या परिणाम एक गलत नकारात्मक है।
यदि परिणाम सकारात्मक या कमजोर रूप से सकारात्मक (समतुल्य) है, तो पुष्टिकारक पश्चिमी धब्बा परीक्षण, जिसे उच्च विशिष्टता की विशेषता है, प्रदर्शन किया जाना चाहिए।
यह पुष्टि करना है कि एलिसा परिणाम "सच" हैं। डायग्नोस्टिक्स के दौरान, आप उपरोक्त चरणों में से किसी को भी छोड़ नहीं सकते हैं, उदाहरण के लिए, तुरंत वेस्टर्न ब्लॉट विधि का उपयोग करके एक निदान करें या अकेले एक सकारात्मक एलिसा परिणाम के आधार पर निदान करें।
पोलैंड में, लाइम रोग का निदान अक्सर पहले स्क्रीनिंग चरण में समाप्त होता है, जो सकारात्मक या कमजोर रूप से सकारात्मक परिणामों की गलत व्याख्या का कारण बनता है।
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लिम्फोसाइट परिवर्तन परीक्षण (LTT) जानने के लिए अच्छा हैएलिसा परीक्षण - मूल्य। एलिसा परीक्षण की लागत कितनी है?
परीक्षण की लागत PLN 60 के बारे में है और इसे तुरंत किया जाता है। हालांकि, आप रेफरल के परिणामों के लिए लगभग तीन महीने इंतजार कर सकते हैं।
एलिसा परीक्षण - परिणाम। क्या वे झूठे सकारात्मक हो सकते हैं?
अन्य प्रोटीन के साथ IgM एंटीबॉडी के क्रॉस-रिएक्टिविटी के परिणामस्वरूप गलत सकारात्मक परिणाम मिलते हैं। शरीर द्वारा निर्मित एंटीबॉडीज 'गलत तरीके से' अन्य एंटीऑर्गेनिज्म से एक एंटीजन को बोरेलिया एंटीजन के रूप में पहचान सकते हैं।
सबसे आम "गलतियाँ" ट्रेपाइमा पैलिडम, हर्पीसविरस और संक्रमित ल्यूपस एरिथेमेटोसस और अन्य आमवाती रोगों वाले लोगों में होती हैं।
एलिसा परीक्षण - परिणाम। क्या वे झूठे नकारात्मक हो सकते हैं?
संक्रमण के प्रारंभिक चरण में गलत नकारात्मक परिणाम दिखाई दे सकते हैं, फिर लगभग 3-4 सप्ताह के बाद परीक्षण दोहराया जाना चाहिए। यह कहा जाता है सीरोलॉजिकल विंडो, वह संक्रमण का प्रारंभिक काल है जिसमें शरीर अभी तक विशिष्ट एंटीबॉडी का उत्पादन करने में "प्रबंधित" नहीं हुआ है।
यही बात इम्यूनोडिफ़िशियेंसी वाले लोगों पर लागू होती है जो पर्याप्त एंटीबॉडी का उत्पादन नहीं करते हैं।
एक बड़ी समस्या, विशेष रूप से बहुत तीव्र संक्रमणों में, तथाकथित की उपस्थिति है प्रतिरक्षा परिसरों जो बोरेलिया एंटीजन और उनके लिए विशिष्ट एंटीबॉडी से मिलकर बनाते हैं।
नतीजतन, एंटीबॉडी आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले तरीकों जैसे कि एलिसा के लिए "अदृश्य" हो जाते हैं, और हालांकि वे परीक्षण सामग्री में मौजूद हैं, उनका पता नहीं लगाया जा सकता है।
ऐसे मामलों में, प्रयोगशाला प्रतिरक्षा के टूटने का उपयोग कर सकती है। यह उपचार एंटीबॉडी जारी करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। हालांकि, प्रयोगशालाओं में मानकीकरण की कमी के कारण इस पद्धति का व्यापक रूप से उपयोग नहीं किया जाता है।
जानने लायकलाइम रोग का निदान आसान क्यों नहीं है?
यह बोरेलिया के खिलाफ प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की जटिलता और प्रयोगशाला विधियों की सीमाओं के कारण है। किस्मों की विविधता और नए लोगों का उदय जो संक्रमण का कारण बनते हैं, विशेष रूप से यूरोपीय महाद्वीप पर, प्रभावी नैदानिक विधियों के विकास की सुविधा नहीं देते हैं।
अधिक किस्में हाल ही में यूरोप में दिखाई दी हैं, जैसे कि बोरेलिया बिसेटेटी, बोरेलिया वैलैसियाना और बोरेलिया स्पिलमैन। इसके अलावा, शरीर में, बोरेलिया स्पाइरोकेट्स अल्सर में बदल सकते हैं या प्रतिरक्षा प्रणाली की कोशिकाओं के लिए दुर्गम शरीर के स्थानों में रह सकते हैं।
इस प्रकार प्रतिरक्षा प्रणाली के लिए "अदृश्य" होना। इसके अलावा, यह दिखाया गया है कि ऊतकों में बैक्टीरिया के टुकड़े हो सकते हैं जिनमें दृढ़ता से समर्थक भड़काऊ गुण होते हैं। माना जाता है कि नकारात्मक प्रयोगशाला परीक्षण के परिणामों के बावजूद, लाइम रोग के पुराने लक्षणों के लिए जिम्मेदार हैं।
साहित्य
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3. टिक-जनित रोगों की प्रयोगशाला निदान। कार्य समूह की सिफारिशें: प्रयोगशाला के निदान के राष्ट्रीय चैंबर, सार्वजनिक स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान-स्वच्छता के राष्ट्रीय संस्थान, संक्रामक रोगों के क्षेत्र में राष्ट्रीय सलाहकार, संक्रामक रोग विभाग और न्यूरोइन्फेक्शन, मेडिकल यूनिवर्सिटी ऑफ बायोलस्टॉक, पॉलिश सोसायटी ऑफ विरोलॉजी, वारसॉ 2014
4. होसेनी एस। एट अल।: ए से जेड स्प्रिंगर 2017 तक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा)।